A tecnologia Guidling permite que você aprenda o método simples e eficiente de dessalinização e concentração

As proteínas muitas vezes precisam ser dessalinizadas após separação e purificação, e esses sais são derivados principalmente de vários íons em organismos vivos (por exemplo, íons sódio, íons potássio, íons cloreto, etc.), bem como sais tampão nos extratos, sais no eluentes e componentes salinos de certos desnaturantes usados ​​em experimentos. Altas concentrações de sal podem afetar a atividade e a estabilidade das proteínas, bem como suas interações com outras moléculas, gerando sinais interferentes ou reduzindo a precisão das medições em métodos analíticos subsequentes, como eletroforese, espectrometria de massa e estudos cristalográficos. Portanto, é muito necessário dessalinizar as proteínas purificadas após a separação, e os principais métodos de dessalinização frequentemente utilizados são a cromatografia de membrana (diálise e ultrafiltração) e de filtração em gel. Além disso, em alguns casos, a dessalinização também pode ser conseguida por diluição.

 

Dessalinização de diálise, devido ao longo ciclo e à necessidade de grande quantidade de fluido de reposição, sua aplicação tem sido bastante restrita, sendo menos utilizada na indústria, mas principalmente parcialmente utilizada em laboratório, o laboratório também é gradativamente substituído por tubos de ultrafiltração /copo de ultrafiltração.

 

A principal tecnologia de separação por membrana utilizada no processo de dessalinização e concentração de proteínas é a ultrafiltração. A ultrafiltração é uma tecnologia de separação por membrana com alta eficiência, baixo consumo de energia, sem mudança de fase, sem necessidade de adição de reagentes químicos, fácil operação, condições amenas, capacidade de manter melhor a atividade de macromoléculas biológicas, alta taxa de recuperação e outras vantagens , e seu uso na separação e purificação de proteínas apresenta vantagens únicas.

 

A ultrafiltração é um método de filtração por membrana que utiliza uma membrana porosa como meio de separação e depende da diferença de pressão entre os dois lados da membrana como força motriz para separar substâncias de diferentes pesos moleculares em solução, desempenhando assim um papel na dessalinização, concentração e purificação. Este é um novo método desenvolvido nos últimos anos, mais adequado para a concentração ou dessalinização de macromoléculas biológicas, especialmente proteínas e enzimas. A chave para a aplicação da ultrafiltração é a escolha da membrana, diferentes tipos e especificações da membrana, possuem diferença na vazão de água, corte de peso molecular e outros parâmetros, devendo ser selecionados de acordo com as necessidades relevantes do trabalho. Além disso, a forma do dispositivo de ultrafiltração, a composição e propriedade do soluto, a concentração da solução, etc. têm certa influência no efeito da ultrafiltração.

 

A aplicação da tecnologia de ultrafiltração para dessalinização e concentração de proteínas no processo de purificação de proteínas caracteriza-se pela sua adequação ao tratamento de grandes quantidades de líquidos que variam de algumas centenas a alguns milhares de litros com as vantagens de simplicidade de operação, economia de tempo e alta taxa de recuperação de proteínas. O método de ultrafiltração é desenvolvido a partir de tubos de ultrafiltração para processamento de microvolumes em laboratório, copos de ultrafiltração para processamento de pequenos volumes e sistemas de ultrafiltração para uso industrial.

 

A ultrafiltração é subdividida em ultrafiltração de pressão direta e filtração de fluxo tangencial e, atualmente, a filtração de fluxo tangencial é usada principalmente na indústria, que é amplamente utilizada na dessalinização e substituição de buffer.

 

A seguir está um exemplo da aplicação dos cassetes de membrana de ultrafiltração da Guidling Technology na dessalinização e concentração de proteínas.

 

Usamos um cassete de membrana de tamanho de poro de {{0}} 0,11㎡ 10 kd (G01100010K) para dessalinizar e concentrar 500 mL de solução de hormônio de crescimento modificado com PEG a uma concentração de 0,2 mg/mL. Ao longo do processo de ultrafiltração, foram examinadas a taxa de dessalinização, a taxa de recuperação de proteínas, a condição de falha do fluxo da membrana e a taxa de recuperação do fluxo de água.

 

Antes e depois do uso, testamos o fluxo de água do cassete de membrana separadamente, e a taxa de recuperação dos cassetes de membrana atingiu 98% sob a premissa de manter a mesma taxa de alimentação, pressão de alimentação e pressão de refluxo.

 

Todo o processo processou um total de 2L de material e levou 40min, 0-5min foi o processo de concentração, 5-35min foi o processo de troca de líquido e 35-40min foi o processo de superconcentração. Durante todo o processo de ultrafiltração, o TMP foi estabilizado entre 0,7-00,8 bar, a taxa de alimentação foi constante e o fluxo médio de material foi de 27 LMH.

 

2L de troca de líquido concentrado de material para 60mL, cerca de 33 vezes concentrado, a taxa de dessalinização chega a 99%, a taxa de recuperação chega a 80%, após uma lavagem, um aumento de 50mL de líquido, a recuperação total de 88%, produção industrial de acordo com o volume morto dos cálculos do gasoduto, na medida do possível para aumentar o número de vezes da lavagem superior, a lavagem superior geral 3 vezes pode ser completamente recuperada.

 

Os cassetes de membrana Guidling Technology são feitos de materiais inertes de qualidade médica com forte resistência à corrosão e podem suportar forte limpeza alcalina; o uso de processo de fabricação automatizado garante a continuidade e confiabilidade da qualidade do produto, maior resistência mecânica, resistência à contrapressão e desempenho de enxágue repetido; possui super hidrofilicidade, o que pode conferir à membrana maior fluxo e menor adsorção de proteínas; também temos um design de canal de fluxo otimizado com menor queda de pressão, o que facilita a transferência de material e reduz significativamente o tempo de filtração.

 

Nossos cassetes de membrana estão disponíveis em uma ampla variedade de tamanhos de poros, de 1kd a 1000kd. Entre eles, cassetes de membrana de ultrafiltração 1-10kd podem ser usados ​​para dessalinização e remoção de pirogênio; Cassetes de membrana de ultrafiltração de 30kd podem ser usados ​​para concentração de anticorpos monoclonais e substituição de tampão; ao mesmo tempo, nossos produtos de fibra oca também podem ser usados ​​para concentração e substituição de produtos biológicos, com tamanhos de poros de 100kd, 300kd e 500kd, que são usados ​​principalmente para um grande número de aplicações em produtos de vacinas.

 

A Guidling Technology é uma empresa nacional de alta tecnologia com foco em produtos biofarmacêuticos, cultura celular, purificação e concentração de biomedicina, diagnóstico e fluidos industriais. Desenvolvemos com sucesso dispositivos de filtro centrífugo, cassetes de ultrafiltração e microfiltração, filtro de vírus, sistema TFF, filtro de profundidade, fibra oca, etc. Nossas membranas e filtros de membrana são amplamente utilizados em concentração, extração e separação de pré-filtração, microfiltração, ultrafiltração e nanofiltração. Nossas diversas linhas de produtos, desde filtração laboratorial pequena e descartável até sistemas de filtração de produção, testes de esterilidade, fermentação, cultura celular e muito mais, atendem às necessidades de testes e produção. A Guidling Technology está ansiosa para cooperar com você!