Aplicação de ultrafiltração na concentração e purificação de vacina contra gripe aviária
Aplicação deUltrafiltração noCconcentração ePurificação deAvianIgripeVacina
A gripe aviária é uma doença infecciosa das aves causada pelo vírus influenza A, com sintomas que variam desde respiratórios até sepse sistêmica grave. A gripe aviária se espalha facilmente entre as aves e costumava ser conhecida como "peste aviária", que é classificada como doença infecciosa de categoria A pela OIE.
Surtos de gripe aviária ocorreram na Austrália, Itália, Hong Kong, China e Países Baixos, respectivamente, em 1994, 1997, 1999 e 2003, e principalmente no Sudeste Asiático e na Europa em 2005. O surto de gripe aviária de 2022 teria causado a produção de aves em 47 Os estados dos EUA perderão um total de quase 59 milhões de aves, incluindo galinhas poedeiras, perus e frangos de corte, com perdas governamentais superiores a US$ 660 milhões, tornando-o o surto de gripe aviária mais mortal da história dos EUA. O último relatório de 25 de outubro de 2023, indicaram que casos de GAAP surgiram em outubro em vários estados dos EUA, com o número total de aves infectadas excedendo 600,000, das quais mais de 290,000 tiveram que ser abatidas para evitar a propagação da doença doença.
PARTE 1
AvianIgripeVacina
O principal estudo da aplicação da ultrafiltração na concentração e purificação da vacina contra influenza aviária H9N2 será apresentado aqui.
A gripe aviária H9N2 é um subtipo de vírus de baixa patogenicidade pertencente à família Orthomyxoviridae. Este subtipo é predominante na indústria avícola como fator infeccioso, por isso tem havido um interesse especial no desenvolvimento da produção de vacinas contra a gripe aviária H9N2. As vacinas contra a gripe aviária H9N2 são produzidas matando o vírus e usando uma mistura de antígeno inativado e fase oleosa. Um processo baseado em ovo é atualmente usado para preparar vacinas inativadas contra a gripe aviária. Os antígenos virais dos ovos contêm grandes quantidades de proteínas indesejadas que podem afetar adversamente a formulação da vacina. Além disso, a produção de vacinas combinadas em doses baixas requer concentrações aumentadas de antígenos. Isto enfatiza a necessidade de aumentar a concentração de antígeno, melhorando a purificação a jusante.
processos.
Após a colheita e clarificação do fluido alantóide contendo vírus, este foi concentrado e purificado pelo método de ultrafiltração. As amostras concentradas e purificadas foram analisadas quanto aos níveis de ovalbumina.
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Como pode ser visto no eletroferograma SDS-PAGE, a concentração e a purificação podem efetivamente remover a heteroproteína.
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A análise dos títulos de HI em galinhas vacinadas com antígeno purificado concentrado mostrou que a resposta imune esteve acima do nível limite (HI=5) durante 4 meses após a vacinação e atingiu o pico apenas no 99º dia após uma vacinação. Com base no padrão de duração da imunização, os níveis de anticorpos podem ser suficientes para cobrir o nível limite dentro de 6 meses.
A vacina concentrada e purificada foi eficaz na melhoria da resposta imunológica dos pintinhos vacinados a longo prazo. Com base nos resultados acima, o uso da tecnologia de ultrafiltração pode ser considerado para otimizar o processo a jusante (concentração e purificação) da produção da vacina contra a gripe (H9N2), a fim de preparar vacinas sustentáveis em grande escala, sem quaisquer fatores de risco adversos.
Os cassetes de membrana de ultrafiltração da Guidling Technology têm sido amplamente utilizados em P&D e produção de epidemias e vacinas de gripe aviária, com taxas de recuperação e fluxos próximos aos de congêneres estrangeiros, e professores do setor são bem-vindos para avaliar.
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